39. (简答题, 4分)Ras蛋白在信号转导中的作用。ras基 因突变会导致蛋白GTP酶活性丧失,并且会导致正常细胞发生癌变。请解释这一现象。
(1)Ras蛋白在信号转导中的作用: Ras蛋白是一种小的GTP结合蛋白,具有GTP酶活性,位于胞质侧,结 合GTP时为活化态,结合GDP时失活。Ras蛋白具有分子开关作用,激 活磷酸化级联反应。GAP增强Ras蛋白的GTP酶活性。 (2)突变Ras致癌的可能机制: 发生突变的Ras蛋白能够与GTP结合,但不能将其水解成GDP,从而使 自身锁定于活化状态,导致变性、细胞转化和肿瘤发生。
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36. (简答题, 5分)癌细胞的基本特征
(1)细胞生长与分裂失去控制:癌细胞失去控制,成为“不死”的永生细胞,核质比例增大,分裂速度加快,破坏正常组织的结构与功能。
(2)具有浸润性和扩散性:恶性肿瘤细胞(癌细胞) 的细胞间黏着性下降, 具有浸润性和扩散性,易于浸润周围健康组织, 或通过血液循环和淋巴途径转移并在其他部位黏着和增殖,具有转移灶, 这是癌细胞的基本特征。
(3)细胞间相互作用改变:癌细胞冲破细胞识别作用的束缚,在转移过程中,除了会产生水解酶类(如用于水解基底膜成分的酶类),而且要异常表达某些膜蛋白,以便与其他细胞黏着和继续增殖。 并借此逃避免疫系统的监视, 防止天然杀伤细胞等的识别和攻击。
(4)表达谱改变或蛋白质活性改变:癌细胞的蛋白质表达谱系中,往往出现一些在胚胎细胞中所表达的蛋白质, 如在肝癌细胞中表达胚肝细胞中的多种蛋白质。多数癌细胞中具有较高的端粒酶活性。此外癌细胞还异常表达与其恶性增殖、 扩散等过程相关的蛋白质组分,如纤连蛋白表达减少, 如蛋白激酶Src、 转录因子Myc等过量表达。
(5)体外培养的恶性转化细胞的特征: 转化细胞同癌细胞一样具有无限增殖的潜能, 在体外培养时贴壁性下降, 可不依附在培养器皿壁上生长, 有些还可进行悬浮式培养, 癌细胞失去运动和分裂的接触抑制, 在软琼脂培养基中可形成细胞克隆, 这也是细胞恶性程度的标志之一。
(6)抵御死亡: 癌细胞凋亡调控通路的抑制, 获取了抗细胞凋亡的能力。
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46. (名词解释, 1分)cyclin-dependent kinase:
cyclin-dependent kinase周期蛋白依赖性激酶:CDK蛋白是依赖于细胞周期蛋白的一类蛋白激酶, 可以和周期蛋白结合并接受后者的调节,可以磷酸化其他蛋白,在细胞周期中发挥重要的作用。 CDK蛋白包括CDK1~13,其中CDK1即MPF。各种CDK均含有一段类似的CDK激活结构域, 且不同CDK结合的周期蛋白不同,在细胞周期中执行不同的调节功能
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67. (论述题, 10分)目前学术界对于主动运输与被动运输有这样一种说法,即被动运输是"减少细胞与周围环境的差别",而主动运输则是"努力创造差别,维持生命的活力",请结合所学谈谈你对于这个说法的理解。
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66. (论述题, 10分)什么是细胞内膜系统,它包括哪些结构?以溶酶体酶合成分选的M6P合成途径为例说明它们在功能上的相关性。
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3)MPF的提纯工作:1988年Lohka等将MPF进行了高度纯化,证实,MPF是p34cdc2和周期蛋白B的复合物,其中p34cdc2是催化亚基,具有丝/苏氨酸激酶活性;周期蛋白B是调节亚基,具有激活p34cdc2活性等功能。当周期蛋白B和p34cdc2结合并经进一步活化形成活化的MPF后,细胞才能从G2期进入M期。由此证明,MPF是一种蛋白激酶。 (2分)
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62. (名词解释, 1分)immunofluorescence technic:
immunofluorescence technic的中文名称是免疫荧光技术,是指用免 疫荧光方法检查抗体、抗原或免疫复合物的试验,是免疫学和荧光技术 相结合的技术。免疫荧光可用于确定细胞表面或内部抗原抗体的位置以 及识别组织或渗出物中的致病性微生物,故广泛应用于免疫学、细胞生 物学和临床医学中。该技术可分为直接免疫荧光技术和间接免疫荧光技 术。
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54. (名词解释, 1分)heat shock protein, HSP:
热休克蛋白(heat shock protein, HSP):一类进化上高度保守的蛋 白质家族,作为分子伴侣(molecular chaperone)发挥多种作用,协助细胞内蛋白质合成、分选、折叠与装配等
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1)简单扩散特点是: ①沿浓度梯度(电化学梯度)方向扩散(由高到低) ②不需细胞提供能量 ③没有膜蛋白协助
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3)在这个过程里内质网是合成蛋白质和对蛋白质进行初步加工的场所,高尔基体是一个主要的分选场所,最终分选好的蛋白质以出芽的方式形成膜泡被定向运输。(1分)
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